考慮色譜分離柱效時至關重要,要注意哪些問題
點擊次數(shù):2268 更新時間:2022-06-17
色譜分離柱在使用前落實落細,更好進(jìn)行柱的性能測試提供了有力支撐,并將結(jié)果保存起來重要作用,作為今后評價柱性能變化的參考技術特點。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品著力增加、流動相競爭力、柱溫等條件的差異而有所不同充分;另外,在做柱性能測試時是按照色譜分離柱出廠報告中的條件進(jìn)行(出廠測試所使用的條件是更佳條件)集聚,只有這樣競爭力,測得的結(jié)果才有可比性。
有效的辦法是純化樣品。我們在多年的分析工作中發(fā)現(xiàn)機製性梗阻,凡是樣品純化的越干凈機製,分離柱的壽命就越長;反之集成應用,只有提取沒有純化的樣品探討,分離柱柱效下降較快。建立一個理想的色譜分析方法應(yīng)該有一套有效的樣品前處理方法高效流通,特別是在分析血漿和尿液樣品時調解製度,要特別注意樣品的提取與純化,盡量使處理過的樣品中雜質(zhì)降到較低功能,保護(hù)柱頭和柱子應用的因素之一。
提取純化好的樣品最好用流動相來溶解,一方面減少色譜圖中的溶劑峰干擾預期,另一方面也是檢查樣品在流動相中的溶解性敢於監督,如果樣品進(jìn)樣后在流動相中沉淀,會堵塞進(jìn)樣器和柱頭結構,甚至樣品分解重要的作用,出現(xiàn)怪峰。如果出現(xiàn)樣品與流動相不溶要設(shè)法改變?nèi)芙鈼l件強大的功能,如更換樣品溶劑實際需求,或改進(jìn)處理樣品的方法,或過濾優勢,去除不溶性物質(zhì)善謀新篇。
在考慮色譜分離柱效時,需要特別注意以下幾個問題便利性。
一方法、決定組分保留值的分配系數(shù):分配系數(shù)K=溶質(zhì)在固定相中的濃度/溶質(zhì)在流動相中的濃度。K值小的組分在固定相中濃度小提供有力支撐,所以容易隨流動相運動而較早出峰切實把製度,反則反之。
二自行開發、決定組分保留值的分配比(容量因子):容量因子=組分在固定相中的量/組分在流動相中的量進行部署。
三、選擇性因子α:即后出峰的組分的調(diào)整保留時間與先出峰的組分的調(diào)整保留時間的比值應用情況。
因為組分在色譜分離柱內(nèi)移動時保護好,會逐步產(chǎn)生擴(kuò)散,不利于分離表現,影響色譜分離柱的分離效率特點,所以塔板數(shù)高者好深刻變革。使用過程中,當(dāng)塔板數(shù)降到一定程度時該柱就報廢了和諧共生。